紫外可見分光光度計是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進行分析的一種分析儀器。以下是對紫外可見分光光度計的詳細介紹:
一、基本原理
吸收光譜:分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其特別的、固定的吸收光譜曲線。
定性與定量分析:根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
Lambert-Beer定律:A=εbc,(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),b為液池厚度,c為溶液濃度)。即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度成正比?;谠摱桑梢詫θ芤哼M行定量分析。
二、主要構(gòu)造
光源:提供足夠強度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈,可見光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。
單色器:將光源發(fā)出的復合光分解并從中分出所需波長的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種,它是分光光度計的心臟部分。
吸收池:又稱比色皿,供盛放試液進行吸光度測量之用??梢姽鈪^(qū)的測量用玻璃吸收池,紫外光區(qū)的測量須用石英吸收池。
檢測器:通過光電轉(zhuǎn)換元件檢測透過光的強度,將光信號轉(zhuǎn)變成電信號。常用的光電轉(zhuǎn)換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測器。
信號顯示系統(tǒng):將檢測器輸出的信號放大并顯示出來。
三、分類
按光路系統(tǒng):可分為單光束和雙光束分光光度計。
按測量方式:可分為單波長和雙波長分光光度計。
按繪制光譜圖的檢測方式:可分為分光掃描檢測與二極管陣列全譜檢測。
四、主要應用
定量分析:廣泛用于各種物料中微量、超微量和常量的無機和有機物質(zhì)的測定。
定性和結(jié)構(gòu)分析:紫外吸收光譜還可用于推斷空間阻礙效應、氫鍵的強度、互變異構(gòu)、幾何異構(gòu)現(xiàn)象等。
反應動力學研究:研究反應物濃度隨時間而變化的函數(shù)關(guān)系,測定反應速度和反應級數(shù),探討反應機理。
溶液平衡的研究:如測定絡(luò)合物的組成、穩(wěn)定常數(shù)、酸堿離解常數(shù)等。